核酸提取純化系統是通過(guò)細胞裂解液裂解樣本,從樣本中游離出來(lái)的核酸分子被特異的吸附到磁性顆粒表面,而蛋白質(zhì)等雜質(zhì)不被吸附而留在溶液中,在磁場(chǎng)作用下,使磁性顆粒與液體分開(kāi),回收顆粒(即磁珠-核酸混合物),再用洗脫液洗脫即可以得到高純度的核酸。
核酸提取純化系統的實(shí)驗重復性、穩定性好,操作簡(jiǎn)單,觸屏可視化界面。體積小巧、運輸方便、占據實(shí)驗空間小。專(zhuān)業(yè)的結構設計,儀器運行接近靜音。操作軟件設計通用性強,可適合各廠(chǎng)家提取試劑盒。內置電池,在突然斷電情況下仍然可以繼續運行。一次性磁棒套、紫外滅菌燈及排氣系統(HEPA)的使用,可有效保障環(huán)境和人員的生物安全,并且可有效截留氣溶膠,避免不同批次試劑間的交叉污染。
核酸提取純化系統實(shí)際應用時(shí)的常見(jiàn)問(wèn)題分析:
一、提取核酸得率較低
1.樣品量與試劑的配比要控制在一定范圍,避免超過(guò)裂解能力。
2.破碎研磨的步驟處理細節很重要,一定要充分研磨,這是核酸提取的條件。
3.在洗脫的步驟,使用足量的洗脫液洗脫并充分混勻,避免有團塊殘存。
4.實(shí)驗耗材要匹配,如不同的吸附柱或磁珠的核酸吸附能力不同,也會(huì )影響核酸的得率。
二、提取核酸出現降解
1.提取的樣品量要符合試劑的配比,盡量控制樣品量達到合適比例。
2.每個(gè)步驟都要注意充分的混合均勻,避免團塊的殘留影響實(shí)驗結果。
3.在洗脫時(shí),時(shí)間過(guò)長(cháng)或者溫度過(guò)高,核酸有可能會(huì )降解。
4.樣本切記不可反復凍融,提取的樣本要注意在合適的溫度保存,長(cháng)期保存盡量-80℃。
三、提取核酸純度不高
1.樣本量和裂解液等試劑的配比要盡量控制到合適的范圍。
2.混合均勻以確保裂解充分和沒(méi)有團塊殘留。
3.晾干的步驟要充分,否則可能會(huì )導致醇類(lèi)等雜質(zhì)的殘留。
4.磁棒振蕩幅度太小或混合時(shí)間太短,磁珠上有雜質(zhì)殘留會(huì )影響磁珠吸附核酸的能力。